1 Федеральное государственное бюджетное учреждение Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Россия, 142290, Московская область, г. Пущино,
ул. Институтская, 3. +7(4967)739421, e-mail: a_junusova@rambler.ru
2 Институт Биохимии имени А.Н. Баха ФИЦ Биотехнологии РАН, Москва
3 Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова, химический факультет, факультет биоинженерии и биоинформатики, НИИ физико-химической биологии имени А.Н. Белозерского
Резюме
Большая субъединица гетеродимерной эндонуклеазы рестрикции R.BspD6I в отсутствие малой субъединицы ведет себя как самостоятельный фермент, никующая эндонуклеаза, и вносит разрыв в верхнюю цепь ДНК узнаваемой последовательности. Малая субъединица проявляет активность только в присутствии большой субъединицы и вносит разрыв в нижнюю цепь ДНК. Для того чтобы выяснить, какие свойства большой субъединицы важны для проявления активности малой субъединицы, в работе были получены две мутантные формы большой субъединицы (D456A и E418A), утратившие активность. Результаты показали, что малая субъединица в присутствии мутантых форм не проявляет активности. Высказано предположение, что активная большая субъединица, взаимодействуя с ДНК, приобретает такую ориентацию, что малая субъединица становится способной к гидролизу ДНК.