Совершенствование методики комбинированного иммунологического и морфологического исследования клеток с использованием биочипа
А.В. Шишкин1, Н.Г. Овчинина1, С.С. Бессмельцев2
1- ГОУ ВПО Ижевская государственная медицинская академия, г. Ижевск
e- mail: Shishkin_lab@mail.ru
2- Российский НИИ гематологии и трансфузиологии, г. Санкт- Петербург
e-mail: bsshem@hotmail.com
Резюме
Применение иммунологических биочипов, содержащих иммобилизованные антитела, дает возможность определения поверхностных антигенов клеток. При использовании биочипов, изготовленных на прозрачных и химически-стойких подложках связавшиеся клетки могут быть зафиксированы, окрашены и подвергнуты морфологическому исследованию. Данный подход значительно повышает информативность анализа, поскольку позволяет определить, какие именно морфологические субпопуляции клеток экспрессируют каждый из определяемых с помощью биочипа антигенов. В представленной работе описана усовершенствованная методика проведения подобного комбинированного исследования.
Ключевые слова
иммунологические биочипы, поверхностные антигены клеток, иммуноморфологическое исследование клеток.
1. Chang T.W. Binding of cells of distinct antibodies coated on solid surface// J. Of immunological methods. - 1983. - Vol. 65. - P. 217-223.
2. Belov L, de la Vega O, dos Remedios C.G., Mulligan S.P., Christopherson R.I. Immunophenotyping of leukemias using a cluster of differentiation antibody microarray//Cancer research. - 2001. - Vol. 61. - P. 4483-4489.
3. Belov L., Huang P., Barber N. et al Identification of repertoires of surface antigens on leukemias using an antibody microarray //Proteomics.-2003.-Vol.3.-P.2147-2154.
4. Belov L., Huang P., Chrisp J.S. et al. Screening microarrays of novel monoclonal antibodies for binding to T-, B- and myeloid leukaemia cells B// Journal of Immunological Methods.-2005.-Vol.305-P.10-19.
5. White S.L., Belov L., Barber N. et al. Immunophenotypic changes induced on human HL60 leukaemia cells by la,25-dihydroxyvitamin D3 and 12-O-tetradecanoyl phorbol-13- acetate//Leukemia Research.- 2005.-Vol.29.- P.1141-1151.
6. Campbell C.J., O'Looney N., Chong Kwan M. et al. A cell interaction microarray for blood phenotyping// Anal.Chem.- 2006.-Vol.78.- P.1930-1938.
7. Ellmark P., Belov L., Huang P. et al. Multiplex detection of surface molecules on colorectal cancers// Proteomics.- 2006.-Vol.6.-P.1791-1802.
8. Woolfson A., Stebbing J., Tom B. et al. Conservation of unique cell-surface CD antigen mosaics in HIV-1-infected individuals// Blood.- 2005.-Vol.106. 3.- P.1003-1007.
9. Ko I.K., Kato K. & Iwata H. Antibody microarray for correlating cell phenotype with surface marker //Biomaterials.- 2005.- Vol.26.- P.687-696.
10. Liu A.Y. Differential Expression of Cell Surface Molecules in Prostate Cancer Cells// Cancer Research.-2000.-Vol.60.-P.3429-3434.
11. Шишкин А.В., Шмырев И.И., Кузнецова С.А. и др. Иммунологические биочипы для параллельного определения поверхностных антигенов и морфологического исследования клеток// Биологические мембраны.- 2008.- №4.-С.277-284.
12. Шишкин А.В., Шмырев И.И., Кузнецова С.А. и др. Иммунологические биочипы для исследования эритроцитов человека. «Биологические мембраны».- 2008.- №4- С.267-276.
13. А.В. Шишкин Иммунологический биочип для определения иммунофенотипа клеток и их морфологического исследования// Морфологические ведомости. - 2008.- №1-2.- С. 135-137.
14. Шишкин А.В. Иммунологические биочипы для исследования клеток. Собственный опыт разработки. Некоторые новые подходы к проведению анализа// LAP Lambert Academic Publishing & Co. KG, 2010. – 158 с.